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万历三年（1575）李流芳出生于嘉定南翔一户官宦人家。原籍南直隶徽州府歙县（今安徽歙县南丰），祖父
李流芳青少年时，潜身东林庵中，认真念书，企求科举入仕。万历三十四年(1606)，32岁中举，后又两度赴京加入殿试皆不第。时朝廷为太监魏忠贤及其党羽独霸，仕途凶吉难料。他感应气馁，回抵家乡，自建“檀园”，绝意仕途。他经常游览杭州西湖，一边游湖一边作画，并提笔写下一系列题跋，一派高人逸士之风度。为人耿直，诗风清新自然，文品为士林翘楚。魏忠贤建生祠不往拜，与人云：“拜，一时势，不拜，千古事。”
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李流芳和程嘉燧，诗文字画齐名。李氏曾对挚友钱谦益说：“精舍轻舟，晴窗明己，看孟阳（程嘉燧）吟诗作画乃是生平第一快事。”钱谦益曰：“吾却有二快，兼看兄与孟阳耳。”崇祯元年（1628），钱谦益被放，坐帐论牍，病中的李流芳闻讯，扶枕浩叹：“不行为矣！”
崇祯二年(1629)闰四月三日李流芳卒于檀园，享年五十五岁。钱谦益作《李长蘅墓志铭》，程嘉燧书丹，宋珏篆盖，侯峒曾作《祭李长蘅先生文》。清嘉定诗人林大中有诗夸其“忆当晚明时，官途亦多术。高士多鄙之，坚卧独不出。诗笔能清真，画品亦超轶。不拜千古事，名言殊简质。孝廉忧国家，呕血遂以卒。”大字画家董其昌曰：“其人千古其艺千古！”
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李流芳是明代后期著名的文学家，以诗歌和小品著名于世。天启，崇祯年间，文坛上正是竟陵之气方盛，公安之余波未绝之时。李流芳诗文既差异于以复古求刷新的李攀龙等“后七子”，也有别于
李流芳的诗歌威风凛凛威风凛凛类似于陶渊明的《游斜川》和白居易的《香山集》，他还深受挚友程嘉燧的影响。他以为诗应是性情的真实吐露，性情是诗歌的生命。要做诗，就应该作育自己的性情。至于诗的表达形式，这都是诗人在求体现其性情之时的自然吐露。他的作品就是循着这一看法创作的。
如他的五言诗《过臬亭龙居湾宿永庆禅院统一濂澄心恒可诸上人步月》记其“出西湖”、“向黄鹤”、到龙居湾永庆禅院同远离已久的一濂等僧友欢聚的情景，状“霜余山容浅、天清海气薄”之胜境，抒“暂歇尘劳心，始知寂灭乐”之善缘和“夜长惬深语”的欢趣，以及“千林流素”之时与僧友一道步月吟诗之意境神韵，可与苏轼那首脍炙生齿的《记承天寺夜游》相比并。
李流芳的文章亦为文人所重。内容为叙事怀人、山水游记和题画及序，以题画为多。这些文章不长，但都清新自然，风姿各异；文字平庸，情绪真挚深挚。正如黄宗羲所言：“长蘅无他大文，其题画册，潇洒数言，便使读者如身出其间，真是文中有画也。”