栽培种选用14 cm×28 cm菌种袋时, 各个品种在适宜的培养料中培养, 菌丝在合适的温度下暗室约培养25 天长满菌种袋, 即接种后约30 天就可使用。
1 栽培地点
栽培羊肚菌可以在“三分阳七分阴”的林地中, 或在花木行间闲置的土地上, 有条件者可以进行室内床栽或室外荫棚畦式栽培]。栽培场地不宜阳光直射, 有树叶、遮阳网或大棚遮光即可。在林地或田间中, 土壤既能保湿又不积水好, 土壤酸碱度中性即可, 栽种前可以用生石灰进行土壤消毒杀菌，如果引起ph过高可以用益富源菌菇生态宝调回。栽培场地旁要挖排水沟, 将雨水及时排走。
2 栽培季节
羊肚菌相比于其他常见食用菌, 适宜温度较低的地区栽培, 是一种低温型食用菌。野外栽培时, 在北方一般是一年一季, 第一年10月左右播种, 第二年4月份即可收获]。而在四川等南方地区, 羊肚菌可以栽培两季, 冬季播种在11月下旬到12月上旬, 春季播种在2月中旬到3月上旬。羊肚菌脱袋覆土在合适的气温下约30天出菇。
3 栽培种管理
栽培种制作以及发菌温度与原种一致，防止环境应激影响产量。
分批下种：目前, 一个生产基地内的羊肚菌品种单一, 栽种的面积太大, 甚至同时一批播种的羊肚菌达几十公顷;到了羊肚菌采收季节, 同时出菇, 采收需要大量劳动力, 而当前农村劳动力严重不足, 子实体常因采收不及时而在大田中腐烂, 严重影响经济效益。在羊肚菌栽培时可以考虑栽种不同成熟期的品种, 同一品种也可以考虑分不同时间段先后下田栽种, 建立羊肚菌的不同成熟时间的采收区, 将收获的时间错开, 有利于及时采收和干燥管理。
下种后一般要定期喷洒水雾，保持空气湿度，但水分过多容易造成土壤板结不透气，影响出菇，可以在水中加入益富源菌菇生态宝，补充土壤有益微生物，保持土壤通透性，有利于出菇，且益生菌分泌的蛋白酶可以分解培养料及营养袋中的养分，有利于菌丝吸收，保证营养充足，提早出菇，增产丰收。