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B958细胞系戎猴EBV转化的白细胞

  • 发布时间:2021-09-17 10:10:14
    报价:1180/株
    地址:武汉,江夏,武汉市东湖高新区高新大道666号光谷生物城创新园C
    公司:武汉尚恩生物技术有限公司
    手机:18627859203
    微信:snsw1640
    用户等级:普通会员 已认证

    一、细胞基本属性

    细胞名称:戎猴EBV转化的白细胞

    细胞别称:B95-8; B95.8; B 95.8; B 95-8; B-95-8; B958; GM07404; GM07404D

    细胞货号:SNL-026

    细胞种属:绒猴

    生长情况:悬浮

    培养条件:1640+10%FBS+1%双抗

    培养环境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

    二、细胞培养操作

    换液周期 2-3天

    培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml

    传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

    传代方法 1.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清;

    2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;

    3.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;

    注意事项 部分悬浮细胞会附着瓶底,轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

    三、细胞冻存操作

    冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手建议)或92%完全培养基+8%DMSO(高手建议);

    冻存规格 200-300万/ml,1ml每管

    冻存方法 1. 离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;

    2. 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存

    3. 将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

    注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

    Tips:

    1.细胞悬浮圆形生长,聚团或分散生长;

    2.圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞,如果无法判断,可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率;

    3.悬浮细胞密度维持1E5-5E5/ml之间,密度过低或者过高可能会影响细胞状态;

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