新型冠状病毒2019-nCoV和流感A/B核酸联合检测试剂盒说明书
产品名称
通用名称：新型冠状病毒2019-nCoV和流感A/B核酸联合检测试剂盒（四色荧光PCR法）
包装规格
50测试/盒、100测试/盒
预期用途
本试剂盒用于体外定性检测新型冠状病毒（2019-nCoV）感染的肺炎疑似病例、疑似聚集性病例患者、其他需要进行新型冠状病毒感染诊断或鉴别诊断者的鼻咽拭子、血清或血浆等样本中的新型冠状病毒RNA，同时检测样本中的流感病毒A/B RNA辅助排除疑似病例，可用于对新型冠状病毒感染的鉴别诊断。
检验原理
本试剂盒通过实时荧光PCR扩增检测技术：使用荧光标记的探针，通过检测扩增过程中荧光报告基团发出的荧光强度，实时监控PCR产物的数量。检测探针与内标探针均带有荧光报告基团和淬灭基团，通过标记不同颜色的荧光基团来区分，在不同的波长区独立检测。当探针为完整时，荧光报告基团接近淬灭基团，由于Förster能量转移效应，荧光被抑制。PCR扩增过程中，探针与靶序列杂交，并为Taq DNA聚合酶的5’→3’核酸酶活性所切割。一旦荧光报告基团和淬灭基团分离，淬灭作用被解除，报告荧光增加。通过预设循环数，每次有效循环均会导致报告基团的荧光强度的增加。扩增曲线开始指数增长时的PCR循环数与起始样本的模板数有关。
选取新型冠状病毒2019-nCoV N基因和E基因作为扩增靶区域，设计特异性引物和荧光探针，用FAM标记，检测样本中是否含有新型冠状病毒RNA。选取新型冠状病毒ORF1ab基因，设计特异性引物和荧光探针，用ROX标记，检测样本中是否含有新型冠状病毒RNA。选取流感病毒A/B特征性保守序列，设计特异性引物和荧光探针，用Cy5标记，检测样本中是否含有流感病毒A/B RNA。选取非人基因组非试剂盒检测靶标的其他物种序列设计内标引物探针，用VIC标记，在反应体系中加入内标引物探针，用以监控整个实验流程。
同时，在反应体系中加入UNG酶防污染体系，UNG酶防污染体系的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，形成的有缺失碱基的DNA链，在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂，从而消除PCR扩增产物的污染。
适用仪器
荧光PCR扩增仪：具备四色或多色检测功能的荧光PCR扩增仪（荐使用ABI PRISM®7500、Bio-rad CFX 96、SLAN）。
该试剂盒的主要特点：
1.灵敏度高 500拷贝/ml
2.特异性强，可同时检测2019-nCoV的E、N、ORF1ab 3个不同区的基因序列
3.可同时鉴定、区分流感病毒，避免误诊。
4.一步法RT-PCR，扩增信号强;稳定性高.