1、定性分析
不同结构荧光化合物都有特征的激发光谱和发射光谱,因此可以将荧光物质的激发光谱与发射光谱的形状、峰位与标准溶液的光谱图进行比较,从而达到定性分析的目的。
2、定量分析
在低浓度时,溶液的荧光强度与荧光物质的浓度成正比:F=Kc。其中,F为荧光强度,c为荧光物质浓度,K为比例系数。这就是荧光光谱定量分析的依据。
上述关系不适用于荧光物质浓度过高时,荧光物质浓度过高,其荧光强度反而降低。原因有:
(1)内滤效应。一是,当溶液浓度过高时,溶液中杂质对入射光的吸收作用增大,相当于降低了激发光的强度。二是,浓度过高时,入射光被液池前部的荧光物质强烈吸收,处于液池中、后部的荧光物质,则因受到入射光大大减弱而使荧光强度大大降低;而仪器的探测窗口通常对准液池中部,从而导致检测到的荧光强度大大降低。
(2)相互作用。较高浓度溶液中,可发生溶质间的相互作用,产生荧光物质的激发态分子与其基态分子的二聚物或其他溶质分子的复合物,从而导致荧光光谱的改变和/或荧光强度下降。当浓度更大时,甚至会形成荧光物质的基态分子聚集体,导致荧光强度更严重下降。
(3)自淬灭。荧光物质的发射光谱与其吸收光谱呈现重叠,便可能发生所发射的荧光被部分再吸收的现象,导致荧光强度下降。溶液浓度增大时会促使再吸收现象加剧。
测试要求
1.粉末样品:一般需要20mg以上,块状或薄膜样品要求尺寸在1*25cm-2*50cm之间;
2.液体样品:5ml左右,浓度根据文献调配;测液体的量子效率,需同时提供溶剂5ml;
3.需对比荧光强度的务必备注一下:同一测试条件下测试对比荧光强度;
4.测光谱都是氙灯激发,测寿命常规选用激光器(常规340/375/450的EPL或EPLED)或微秒灯;
5.近红外产率、变温近红外光谱测试等特殊测试价格另议。
确定样品有荧光/磷光性能,样品要光激励下能发光,不然所有荧光类测试都没有意义!对于发光在可见区的样品,最简单直观的就是紫外灯或者紫外暗箱照射下看看样品的发光。
常见问题
1. 测光谱光源需要用到激光器的?
荧光光谱仪测常规发射谱的光源就是氙灯,测寿命的激光器光源不适合来测光谱!有些材料只能在特定激光激发下才能产生荧光,其发射光谱需要特定波长的大功率激光器来测,即激光诱导的荧光。